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    透射及掃描電鏡的操作方法

     更新時間:2016-07-11 點(diǎn)擊量:4765
      一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?br />1、了解透射電鏡、掃描電鏡各部件的名稱、結(jié)構(gòu)及性能;
    2、了解透射及掃描電鏡的基本操作程序;
    3、了解電鏡樣品制備的配套設(shè)備。
    二、實(shí)驗(yàn)儀器及用品:
    透射電鏡;掃描電鏡;小白鼠肝臟超薄切片;酵母菌或乳酸桿菌的負(fù)染樣品;噴好金膜的葉片及花粉樣品
    三、方法步驟:
    (一)透射電鏡操作規(guī)程:
    1、本儀器的操作者必須熟悉儀器的全部操作規(guī)程,通過操作考試后才能正式上機(jī)操作。
    2、操作程序
    1)開機(jī)準(zhǔn)備
    (1) 合上總電源閘刀,開啟電子交流穩(wěn)壓器,電壓指示應(yīng)為220V。開啟循環(huán)水,溫度指示應(yīng)為15-20℃。
    (2) 開啟主機(jī)真空開關(guān)。
    (3) 約20分鐘后,待高真空指示燈及照相室指示燈亮。
    2)工作程序
    (1)開啟主機(jī)電源開關(guān),待熒光屏顯示操作數(shù)據(jù)后再進(jìn)行下一步。
    (2)逐級加高壓致所需電壓,每加一級高壓,必須等高壓表中指示針停止擺動才能加下一級。如指示針移出量程,必須從zui低移級加起。
    (4) 根據(jù)說明書要求進(jìn)行合軸操作,使儀器處于*操作狀態(tài)。
    (4)根據(jù)說明書的操作要求進(jìn)行觀察、換樣和拍照。
    (5)作好實(shí)驗(yàn)記錄及儀器使用記錄。
    3)關(guān)機(jī)程序
    (1)關(guān)燈絲電流。
    (2)關(guān)高壓。
    (3)關(guān)主機(jī)電源開關(guān)。
    (4)關(guān)真空開關(guān)。
    (5) 20分鐘后,關(guān)循環(huán)水和電子交流穩(wěn)壓器開關(guān)。
    (6) 關(guān)閉總電源。
    (二)掃描電鏡操作規(guī)程:
    1、本儀器的操作者必須熟悉儀器的全部操作規(guī)程,通過操作考試后才能正式上機(jī)操作。
    2、操作程序
    1)開機(jī)準(zhǔn)備
    (1)合上總電源閘刀,開啟電子交流穩(wěn)壓器,電壓指示應(yīng)為220V。開啟冷卻循環(huán)水裝置電源開關(guān)。
    (2)開啟試樣室真空開關(guān)(VACUUM POWER),開啟試樣室準(zhǔn)備狀態(tài)開頭(STAND BY)。
    (3)開啟控制柜電源開關(guān)(POWER).
    (4)約20分鐘后,往試樣室液氮冷井中加入液氮。
    2)工作程序
    (1)開啟試樣室進(jìn)氣閥控制開關(guān)(CHAMB VENT),將試樣放入試樣室后將試樣室進(jìn)氣閥控制開關(guān)(CHAMB VENT)關(guān)閉抽真空。
    (2)開啟鏡筒真空隔閥。
    (3)加高壓(ACCELERATION POTENTIAL)至25KV.
    (4)加燈絲電流(FILAMENT)至7.5-8.
    (5)調(diào)節(jié)顯示器對比度(CONTRAST)、亮度(BRIGHTNESS)至適當(dāng)位置.
    (6)將圖象選區(qū)開關(guān)撥至全屏(FULL).
    (7)調(diào)節(jié)聚焦旋鈕(MEDIUM)和(FINE)至圖象清晰。
    (8)選擇適當(dāng)?shù)膾呙杷俾?SCAN RATE)觀察圖象。
    (9)根據(jù)說明書的操作要求進(jìn)行觀察和拍照。
    (10)作好實(shí)驗(yàn)記錄及儀器使用記錄。
    3)關(guān)機(jī)程序
    (1)關(guān)燈絲電流(FILAMENT)。
    (2)關(guān)高壓(ACCELERATION POTENTIAL)。
    (3)反時針調(diào)節(jié)顯示器對比度(CONTRAST)、亮度(BRIGHTNESS)到底.
    (4)關(guān)閉鏡筒真空隔閥。
    (5)關(guān)主機(jī)電源開關(guān)。
    (6)關(guān)真空開關(guān)。
    (7)20分鐘后,關(guān)循環(huán)水和電子交流穩(wěn)壓器開關(guān)。
    (8)關(guān)閉總電源。
    四、觀察結(jié)果:
    1、小白鼠肝臟超薄切片:一般可見細(xì)胞膜、核膜、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、線粒體、肌纖維等結(jié)構(gòu)。
    2、酵母菌或乳酸桿菌的負(fù)染樣品:由于重金屬鹽在樣品周圍的堆積而使樣品顯示負(fù)的反差,從而襯托出樣品的形態(tài)和大小。酵母菌近球型,有時可見出芽生殖;乳酸桿菌為桿狀。
    3、葉片在掃描電鏡下一般可見上表皮有各種紋飾,下表皮可見氣孔器形態(tài)
    4、花粉在掃描電鏡下一般可見表面的萌發(fā)溝和紋飾。
    觀察過程中尋找典型部位進(jìn)行拍照。

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